tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞（B類）是經(jīng)pCAG-tTA質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的Tet-off調(diào)控細(xì)胞系。貼壁生長(zhǎng)，多角形，受強(qiáng)li霉素調(diào)控基因表達(dá)。用于基因功能和腫瘤機(jī)制研究。

更新時(shí)間：2026-03-09

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tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞（B類）試劑盒

tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞（B類）試劑盒（tTA Gene-Modified Mouse Pancreatic Cancer Cell (Type B) Kit），是基于酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）原理研發(fā)的體外診斷/科研檢測(cè)試劑盒，可特異性檢測(cè)相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)樣本中胰腺癌細(xì)胞標(biāo)志物、tTA調(diào)控相關(guān)因子、腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白及信號(hào)通路相關(guān)分子的含量，也可用于該細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中增殖活性監(jiān)測(cè)、tTA調(diào)控效率評(píng)估及藥物作用效果檢測(cè)，經(jīng)特異性驗(yàn)證、靈敏度測(cè)試及重復(fù)性實(shí)驗(yàn)確認(rèn)，無(wú)交叉反應(yīng)，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，無(wú)試劑降解、雜菌污染等問(wèn)題。該細(xì)胞株是通過(guò)tTA（四環(huán)素轉(zhuǎn)錄激活因子）基因修飾小鼠胰腺癌細(xì)胞（B類）獲得的基因工程細(xì)胞株，保留小鼠胰腺癌細(xì)胞（B類）的典型惡性特性，同時(shí)具備tTA基因調(diào)控功能，核心特性是表達(dá)胰腺癌細(xì)胞特異性標(biāo)志物（如CA199、CEA、CA242），可響應(yīng)tTA基因調(diào)控并分泌腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)因子，參與胰腺癌發(fā)生發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移及腫瘤微環(huán)境調(diào)控，廣泛應(yīng)用于胰腺癌發(fā)病機(jī)制研究、tTA基因調(diào)控機(jī)制研究、抗腫瘤藥物篩選等領(lǐng)域，是評(píng)估胰腺癌細(xì)胞功能、tTA調(diào)控效率及藥物干預(yù)效果的重要研究模型，可用于驗(yàn)證抗腫瘤藥物對(duì)胰腺癌細(xì)胞增殖、侵襲的抑制作用研究及tTA調(diào)控相關(guān)通路的干預(yù)效果研究。本試劑盒核心特征是特異性強(qiáng)、操作便捷、檢測(cè)快速，可精準(zhǔn)定量相關(guān)指標(biāo)含量，廣泛應(yīng)用于腫瘤學(xué)科研、分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)、藥物研發(fā)、基因調(diào)控研究等領(lǐng)域，是臨床、科研領(lǐng)域的核心tTA基因修飾胰腺癌細(xì)胞相關(guān)檢測(cè)工具。

檢測(cè)原理

本試劑盒的核心檢測(cè)原理，基于酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），聚焦相關(guān)細(xì)胞檢測(cè)指標(biāo)（胰腺癌細(xì)胞標(biāo)志物、tTA調(diào)控因子、腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移蛋白、信號(hào)通路分子等）的抗原抗體特異性結(jié)合特性，結(jié)合tTA基因修飾小鼠胰腺癌細(xì)胞（B類）功能檢測(cè)的精準(zhǔn)需求設(shè)計(jì)：試劑盒預(yù)先將目標(biāo)檢測(cè)指標(biāo)（如CA199、CEA、tTA調(diào)控相關(guān)因子、TTK激酶）特異性抗體包被于酶標(biāo)板上，加入待檢測(cè)樣本（相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液等）后，樣本中的目標(biāo)指標(biāo)會(huì)與酶標(biāo)板上的抗體特異性結(jié)合，形成抗原-抗體復(fù)合物；洗滌去除未結(jié)合的雜蛋白、胰腺癌細(xì)胞碎片、無(wú)關(guān)細(xì)胞因子及其他胰腺組織相關(guān)蛋白后，加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的二抗，與復(fù)合物特異性結(jié)合，形成“包被抗體-目標(biāo)指標(biāo)-酶標(biāo)二抗"的三明治結(jié)構(gòu)；再加入底物液（TMB），HRP催化底物發(fā)生顯色反應(yīng)，顯色強(qiáng)度與樣本中目標(biāo)指標(biāo)的含量呈正相關(guān)，通過(guò)酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計(jì)算出樣本中目標(biāo)指標(biāo)的具體含量。檢測(cè)流程規(guī)范：樣本采集后需及時(shí)處理（相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)上清離心分離、細(xì)胞裂解液制備），按照試劑盒說(shuō)明書稀釋樣本；酶標(biāo)板平衡至室溫后，依次加入標(biāo)準(zhǔn)品、樣本及空白對(duì)照，37℃孵育30分鐘；洗滌3-5次后加入酶標(biāo)二抗，37℃孵育20分鐘；再次洗滌后加入底物液，37℃避光孵育15分鐘；加入終止液終止反應(yīng)，10分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀測(cè)定OD值，計(jì)算檢測(cè)結(jié)果。

產(chǎn)品特點(diǎn)

本產(chǎn)品針對(duì)相關(guān)細(xì)胞指標(biāo)檢測(cè)需求優(yōu)化制備，核心特點(diǎn)如下：

1. 特異性強(qiáng)：采用高特異性目標(biāo)指標(biāo)（胰腺癌細(xì)胞標(biāo)志物CA199、CEA、CA242、tTA調(diào)控因子、TTK/BUB1B相關(guān)分子等）單克隆抗體，可特異性結(jié)合樣本中的目標(biāo)分子，不與正常小鼠胰腺細(xì)胞雜蛋白、其他腫瘤細(xì)胞系蛋白及無(wú)關(guān)因子發(fā)生交叉反應(yīng)，檢測(cè)特異性＞99%，確保檢測(cè)結(jié)果精準(zhǔn)，有效規(guī)避胰腺癌細(xì)胞相關(guān)檢測(cè)中的干擾因素，同時(shí)可有效區(qū)分胰腺癌細(xì)胞特異性標(biāo)志物的假陽(yáng)性與真實(shí)表達(dá)水平及tTA調(diào)控因子的表達(dá)差異；

2. 質(zhì)控嚴(yán)格：每批次試劑盒均通過(guò)靈敏度、重復(fù)性、特異性及穩(wěn)定性檢測(cè)，附完整QC報(bào)告，確保批內(nèi)變異系數(shù)（CV）＜8%、批間變異系數(shù)（CV）＜10%，檢測(cè)靈敏度可達(dá)0.1ng/mL，符合科研標(biāo)準(zhǔn)，可精準(zhǔn)監(jiān)測(cè)相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中相關(guān)指標(biāo)的微量變化，助力藥物干預(yù)效果及tTA基因調(diào)控效率評(píng)估；

3. 操作便捷：試劑盒含全套檢測(cè)試劑（包被酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)二抗、底物液、終止液、洗滌液等），無(wú)需額外配制核心試劑，步驟簡(jiǎn)單，全程可在2.5小時(shí)內(nèi)完成，適配常規(guī)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室操作，新手易上手；

4. 樣本兼容廣：可適配相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞接種后小鼠血清/胰腺組織勻漿等核心樣本類型，樣本用量少（僅需50μL/孔），無(wú)需復(fù)雜預(yù)處理，僅需簡(jiǎn)單離心、稀釋即可檢測(cè)，適配tTA基因修飾胰腺癌細(xì)胞培養(yǎng)、藥物篩選、胰腺癌發(fā)病機(jī)制及tTA基因調(diào)控機(jī)制研究等多場(chǎng)景樣本；

5. 適配場(chǎng)景廣：可用于相關(guān)細(xì)胞增殖活性監(jiān)測(cè)、tTA基因調(diào)控效率評(píng)估、胰腺癌細(xì)胞標(biāo)志物及信號(hào)通路相關(guān)分子表達(dá)檢測(cè)，胰腺癌發(fā)病機(jī)制、tTA基因調(diào)控機(jī)制研究，抗腫瘤藥物（hua療藥、靶向藥、免疫調(diào)節(jié)劑）的篩選與效果評(píng)估，以及腫瘤學(xué)科研、分子生物學(xué)、藥物研發(fā)實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)檢測(cè)。

適用樣本類型

本試劑盒適配相關(guān)細(xì)胞樣本的體外檢測(cè)與科研實(shí)驗(yàn)，適用樣本類型明確：相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)上清樣本（對(duì)數(shù)期細(xì)胞培養(yǎng)上清，離心去除細(xì)胞碎片）、細(xì)胞裂解液樣本（無(wú)菌收集細(xì)胞后裂解，離心取上清）、細(xì)胞接種后小鼠血清樣本（靜脈采血，離心分離，避免溶血）、胰腺組織勻漿樣本（胰腺組織破碎后離心取上清）；實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景涵蓋相關(guān)細(xì)胞增殖、tTA基因調(diào)控效率監(jiān)測(cè)，胰腺癌細(xì)胞標(biāo)志物及信號(hào)通路相關(guān)分子表達(dá)檢測(cè)，胰腺癌發(fā)病機(jī)制、tTA基因調(diào)控機(jī)制研究，相關(guān)藥物篩選與效果評(píng)估，以及相關(guān)實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)檢測(cè)。推薦檢測(cè)體系：使用試劑盒配套酶標(biāo)板，酶標(biāo)儀（波長(zhǎng)450nm），按照說(shuō)明書步驟操作；樣本稀釋比例為1:10（細(xì)胞裂解液、胰腺組織勻漿可根據(jù)濃度適當(dāng)調(diào)整），標(biāo)準(zhǔn)品濃度梯度為0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6ng/mL，參考區(qū)間為0.2~1.3ng/mL（具體以說(shuō)明書為準(zhǔn)）。（具體樣本處理方法請(qǐng)參考產(chǎn)品說(shuō)明書，該細(xì)胞為貼壁腫瘤細(xì)胞，培養(yǎng)需遵循貼壁腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)范，采用胰腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基（可選用DMEM培養(yǎng)基添加10%胎牛血清及雙抗），接種密度不低于50萬(wàn)個(gè)/mL，復(fù)蘇后需給予一定恢復(fù)期，定期觀察細(xì)胞形態(tài)、增殖狀態(tài)、侵襲能力及tTA基因調(diào)控相關(guān)表型，避免密度過(guò)低導(dǎo)致不增殖，維持細(xì)胞貼壁狀態(tài)避免脫落影響檢測(cè)結(jié)果，培養(yǎng)環(huán)境為5%CO?、37℃恒溫培養(yǎng)箱）

儲(chǔ)存與注意事項(xiàng)

1. 試劑盒需全程2-8℃避光冷藏儲(chǔ)存，嚴(yán)禁-20℃冷凍或常溫放置，避免溫度波動(dòng)導(dǎo)致試劑降解、抗體活性喪失；

2. 標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)二抗等試劑開(kāi)封后，密封冷藏保存，1個(gè)月內(nèi)用完，目標(biāo)指標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品避免反復(fù)凍融，防止其蛋白結(jié)構(gòu)破壞，底物液需避光保存；

3. 樣本采集后及時(shí)處理，相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液冷藏24小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè)，小鼠血清、胰腺組織勻漿冷藏或-20℃短期保存，48小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè)，避免樣本變質(zhì)、目標(biāo)指標(biāo)降解，細(xì)胞樣本需新鮮采集，避免細(xì)胞活力下降、侵襲能力異常及tTA基因調(diào)控功能異常影響檢測(cè)結(jié)果；

4. 操作時(shí)嚴(yán)格遵循無(wú)菌規(guī)范，佩戴防護(hù)用品，避免試劑、樣本接觸皮膚黏膜；檢測(cè)過(guò)程中控制孵育溫度與時(shí)間，洗滌充分，避免未結(jié)合試劑殘留導(dǎo)致結(jié)果偏差；

5. 底物液具有潛在刺激性，終止液為酸性溶液，操作時(shí)需謹(jǐn)慎，避免接觸衣物與皮膚，檢測(cè)完成后按生物安全規(guī)范處理廢棄試劑與酶標(biāo)板；

6. 相關(guān)細(xì)胞樣本需無(wú)菌采集與處理，細(xì)胞裂解液需充分裂解細(xì)胞，離心去除細(xì)胞碎片及雜質(zhì)后再進(jìn)行檢測(cè)，避免雜質(zhì)干擾檢測(cè)結(jié)果；培養(yǎng)上清需在細(xì)胞對(duì)數(shù)期采集，避免細(xì)胞凋亡釋放的蛋白酶導(dǎo)致目標(biāo)指標(biāo)降解，同時(shí)避免培養(yǎng)體系中血清濃度過(guò)高影響檢測(cè)準(zhǔn)確性，藥物干預(yù)實(shí)驗(yàn)及tTA基因調(diào)控干預(yù)實(shí)驗(yàn)中需避免藥物或調(diào)控試劑本身干擾檢測(cè)結(jié)果，腫瘤侵襲實(shí)驗(yàn)中需注意樣本采集時(shí)機(jī)。